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細(xì)胞傳代操作步驟

一、貼壁細(xì)胞傳代（以一個(gè)T25瓶為例）1、吸出原培養(yǎng)液；2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞，吸出PBS丟棄；3、加入1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞，放入培養(yǎng)箱消化；4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯分離變圓，側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞，使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液，這時(shí)可以在顯微鏡看下；6、收集細(xì)胞懸液離心，1...

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原代細(xì)胞如何復(fù)蘇？

細(xì)胞一般儲(chǔ)存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。細(xì)胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細(xì)胞恢復(fù)到一般的生長(zhǎng)狀態(tài)，今天我們來(lái)看看原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟。一、檢查收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請(qǐng)立即處理告訴寄方。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70°C，隔夜后，移到液氮罐保存)。二、冷凍細(xì)胞解凍方法一：1、準(zhǔn)備好37度水浴鍋，預(yù)熱至37度；2、準(zhǔn)備好T2...

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各種類型的胎牛血清的用途是什么？

★我們需要知道都有哪些種類的牛血清和它們的用途：1、透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。2、碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì)，如某些激素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等，去除作用對(duì)分子量大小并無(wú)區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證激素的作用效果。3、去外泌體血清適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。4、低IgG血清用于研究抗體、病毒...

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科研人AB血清，現(xiàn)貨來(lái)襲

科研人AB血清，現(xiàn)貨來(lái)襲人AB血清中缺少抗A、B血型抗原的抗體，常用于使免疫反應(yīng)降到。已經(jīng)證實(shí)，人AB血清可以提高多數(shù)人來(lái)源細(xì)胞生長(zhǎng)速率，并且使用濃度比混合型血清更低。適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動(dòng)物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。采用AB血型正常人血液為原料，經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾后而成。優(yōu)點(diǎn)：人血清用于多種人細(xì)胞的培養(yǎng)效果很好，尤其是與人免疫系統(tǒng)相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)。人血清還能作為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的補(bǔ)充成分、免疫組化染色的封閉劑以及HL...

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血清中的沉淀是什么？WinSera胎牛血清隆重上市~

1.血清沉淀是什么？血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白（絮狀沉淀）、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀）、膽固醇等。纖維蛋白（Fibrin）血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過(guò)程中，血清采集、過(guò)濾（3次0.1μm過(guò)濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成,此時(shí)血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后,血清中纖維蛋白原往往會(huì)發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀。磷酸鈣...

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細(xì)胞培養(yǎng)中的哪些專業(yè)詞兒（傳代細(xì)胞，細(xì)胞系....）

在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，我們經(jīng)常會(huì)聽到一些專業(yè)名詞，原代培養(yǎng)是什么？什么是世代數(shù)？細(xì)胞系是什么？有限細(xì)胞系又代表的是什么？有的專有名詞搞不清楚的話，會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程也會(huì)有一定的影響。根據(jù)老師們的反饋，我們總結(jié)了以下容易混淆的概念供大家參考~1原代培養(yǎng)（Primaryculture）開始于直接取自生物體的細(xì)胞、組織或器官的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。通常代表異質(zhì)細(xì)胞群，很難標(biāo)準(zhǔn)化和繁殖。它們的壽命一般有限，而且已知它們會(huì)隨著時(shí)間而改變其差異特征。2傳代（Passage(Subculture)）...

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何為細(xì)胞老化，培養(yǎng)過(guò)程中如何避免？

何為細(xì)胞老化？1882年，德國(guó)生物學(xué)家Weismann曾大膽預(yù)測(cè)“在細(xì)胞水平存在老化現(xiàn)象”。他推測(cè)：機(jī)體的壽命限制受控于體細(xì)胞的分裂能力；在遺傳進(jìn)化中，不同物種的體細(xì)胞獲得了不同分裂的潛能，從而決定了不同物種的壽命長(zhǎng)短。20世紀(jì)50年代，Swin和他的同事利用原代細(xì)胞體外培養(yǎng)試驗(yàn)證明了來(lái)源于不同物種的纖維細(xì)胞均不具備無(wú)限分裂的潛能。取得突破性進(jìn)展的還是Hayflflick和Moorhead，他們做了更系統(tǒng)更細(xì)致的觀察和描述，他們對(duì)25株人成纖維細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，在這個(gè)過(guò)程中發(fā)...

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何為細(xì)胞老化？

何為細(xì)胞老化？1882年，德國(guó)生物學(xué)家Weismann曾大膽預(yù)測(cè)“在細(xì)胞水平存在老化現(xiàn)象”。他推測(cè)：機(jī)體的壽命限制受控于體細(xì)胞的分裂能力；在遺傳進(jìn)化中，不同物種的體細(xì)胞獲得了不同分裂的潛能，從而決定了不同物種的壽命長(zhǎng)短。20世紀(jì)50年代，Swin和他的同事利用原代細(xì)胞體外培養(yǎng)試驗(yàn)證明了來(lái)源于不同物種的纖維細(xì)胞均不具備無(wú)限分裂的潛能。取得突破性進(jìn)展的還是Hayflflick和Moorhead，他們做了更系統(tǒng)更細(xì)致的觀察和描述，他們對(duì)25株人成纖維細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，在這個(gè)過(guò)程中發(fā)...

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