Mahlavu 人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞特性

1） 來(lái)源：人 肝組織

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣  貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存：干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完quan培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。               

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備DMEM 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完quan培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完quan培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白mei-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完quan培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

下面T25瓶為例；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過(guò)夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 MM.1R

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 MM.1S

人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 MOLT-4

人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5（有限細(xì)胞系）

人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 MT-4

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞 MUM2B

人前B急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 NALM-6

人畸胎癌細(xì)胞 NCCIT

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H1299

人肺腺癌細(xì)胞 NCI-H1395

人肺癌細(xì)胞 NCI-H1437

人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 NCI-H157

人肺支氣管癌細(xì)胞 NCI-H1650[H1650]（MKN-1）

人肺癌細(xì)胞 NCI-H1703

人肺癌細(xì)胞 NCI-H1944

人肺腺癌細(xì)胞 NCI-H1975

人肺癌細(xì)胞 NCI-H2126

人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H226

人肺癌細(xì)胞 NCI-H23

人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) NCI-H292

人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞 NCI-H295R

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  NCI-H358

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H446

人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460 [H460]

人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H661[h661]

人胃癌細(xì)胞 NCI-N87

人胃癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 NCI-N87+LUC

人膽囊癌細(xì)胞 NOZ

人腎癌細(xì)胞 OS-RC-2

人卵巢腺癌細(xì)胞 OVCAR-3

人結(jié)直腸癌細(xì)胞 P53R [JHU-56]  

人胰腺癌細(xì)胞 Panc 03.27

人胰腺癌上皮細(xì)胞 Panc 05.04

人胰腺癌細(xì)胞 PANC-1

人胰腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株 PANC-1/GEM

人胰腺癌細(xì)胞  PANC10.05

人胰腺癌細(xì)胞 PATU8988t（PATU8988）

人胰腺癌細(xì)胞 PATU8988S

人前列腺癌 PC-3

人肺癌細(xì)胞 pc-9

人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞 PL45

人肝癌細(xì)胞 PLC/PRF/5

人胚腎細(xì)胞 ProPakA.6

人正常肝細(xì)胞 QSG-7701

人淋巴瘤細(xì)胞 Raji

人B淋巴瘤細(xì)胞 RAMOS RA1

人肝膽管癌細(xì)胞 RBE

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 RD

人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 REH

人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 RL95-2

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 RPMI8226

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 RKO

人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤 RT4

人前列腺正常細(xì)胞 RWPE-1

人前列腺正常細(xì)胞 RWPE-2

人小細(xì)胞肺癌 SBC-2

人膀胱鱗癌細(xì)胞 SCaBER

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染野生型

人子宮頸鱗癌細(xì)胞 SIHa

人乳腺癌細(xì)胞 SK-BR-3

人乳腺癌細(xì)胞 SK-BR-3+IUC

人肝腹水腺癌細(xì)胞 SK-HEP-1

人低分化肺腺癌細(xì)胞 SK-LU-1

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 SK-MEL-2

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-MEL-2+LUC

人肺鱗癌細(xì)胞 SK-MES-1

人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 SK-N-MC

人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-SH

人卵巢癌細(xì)胞 SK-OV-3

人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-OV-3+LUC

人肝癌細(xì)胞 smmc-7721

人腦膠質(zhì)瘤 SNB-19

人肝癌細(xì)胞 snu-1

人肝癌細(xì)胞 Snu-182

人膀胱上皮永生化細(xì)胞 sv-huc-1

人滑膜肉瘤細(xì)胞 SW982 [SW-982]

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW1116

人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW-13

人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW1353

人胰腺癌細(xì)胞 SW1990

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW480

人甲狀腺癌細(xì)胞 SW579

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 SW620

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP SW620+GFP

142140210 SW620/5FU

人膀胱移行細(xì)胞癌 SW780

人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 T47D

人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 T98G

人食管癌細(xì)胞 TE-1

人食管癌細(xì)胞 TE-12

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 thp-1

人腦膠質(zhì)瘤 TJ905

人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞株 TPC-1

人甲狀腺癌細(xì)胞 TT

人喉癌細(xì)胞 TU212

人喉癌細(xì)胞 TU-138

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U118MG（U-118MG）

人成骨肉瘤細(xì)胞 U-2 OS

人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 U251 MG (KO)

人骨髓瘤細(xì)胞 U266

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U87MG

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤+RFP U87MG+RFP

人淋巴瘤細(xì)胞 U-937

人膀胱移行細(xì)胞癌 UM-UC-3

人前列腺癌細(xì)胞 VCAP

人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 WERI-RB-1

人黑素瘤細(xì)胞 WM-115

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞 WPMY-1

人正常肝細(xì)胞 WRL68

云南宣威人肺腺癌細(xì)胞系+GFP XWLC-05+GFP

人膽囊癌細(xì)胞系 ZJU-0430

人膽囊癌細(xì)胞系熒光素酶標(biāo)記 ZJU-0430+LUC

人乳腺癌細(xì)胞 ZR-75-1

Mahlavu 人肝癌細(xì)胞

豬腎細(xì)胞系 LLC-PK-1 DMEM+10%FBS+1%P/S   貼壁生長(zhǎng)

豬腎細(xì)胞系 PK-13 DMEM+10%FBS+1%P/S   貼壁生長(zhǎng)

豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S  貼壁生長(zhǎng)

豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 PIEC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)