產品名稱：人胃癌細胞五氟尿嘧啶耐藥株SGC7901/5-FU

貨號：QS-A011

細胞規格：1-3×10^6細胞量

庫存狀態：現貨

培養液：90%RPMI-1640+10%FBS+0.2μg/mL 5-FU

凍存條件：80%*培養液+10%FBS+10%DMSO

運輸方式：常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期：復蘇細胞需要1-2周，凍存細胞的需要2-3天（特殊情況會有說明）

質 控：無支原體、無污染、符合標準

研究范圍：僅供科研使用

人胃癌細胞五氟尿嘧啶耐藥株SGC7901/5-FU

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一、客戶收到細胞后需注意事項：

1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。由于運輸途中的影響，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到細胞后，請顯微鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的*培養液，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以提高5％去培養。若細胞達到80%左右，血清濃度按照說明書要求進行調配。

4、收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML培養基繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基培養，懸浮細胞后移回培養瓶。

5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

6、24小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。

    二、培養注意事項：

　　1、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞系的操作。

　　2、無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70% ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣之非無菌區域操作。

　　3、工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

三、培養的相關知識：

1、在細胞凍存時加入溫保護劑，能大大提高凍存效果。常用的低溫保護劑是DMSO，它是一種滲透性保護劑，可迅速透入細胞，提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結過程，能使細胞內水分在凍結前透出細胞外，在胞外形成冰晶，減少胞內冰晶，從而減少冰晶對細胞的損傷。

2、細胞的凍存：先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。接著置于-20℃冰箱，約30-60min。再接著置于-80℃超低溫冰箱中放置，置于液氮罐中長期保存。同時做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。細胞的凍存和復蘇應遵守慢凍快融的原則。

    我公司所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。我公司細胞研究中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于當時的技術條件，中心不保證其準確性，從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考，使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。本公司所有細胞入庫之前均經過嚴格的細胞質量檢測和鑒定，所有細胞在出庫之前均經過一次嚴格的質檢認證，確保細胞到每一位用戶手里都是*狀態。我司匯集了一批專業的細胞生物學技術人員，以*的技術支撐產品，歡迎廣大用戶選購。

 

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