師兄支招|如何避免胎牛血清出現(xiàn)沉淀？

甲：遇到過血清解凍后出現(xiàn)絮狀沉淀，其實(shí)是纖維蛋白析出。后來改成逐步解凍（4℃過夜→室溫復(fù)溫），解凍時(shí)輕輕搖晃，沉淀明顯減少；如果已經(jīng)產(chǎn)生沉淀，用 3000rpm 離心 10 分鐘，上清液可正常使用，不影響細(xì)胞培養(yǎng)。

乙：遇到血清沉淀，首先判斷沉淀類型。若是纖維蛋白析出造成的絮狀沉淀，可400 - 600g離心5 - 10分鐘，取上清使用，不影響血清活性。若沉淀較多且性質(zhì)不明，可將血清在37℃水浴短暫加熱，使蛋白溶解，再輕柔混勻。注意避免劇烈搖晃，防止產(chǎn)生更多沉淀。同時(shí)，盡量采用2 - 8℃緩慢解凍血清，減少反復(fù)凍融，能從源頭降低沉淀產(chǎn)生幾率。

沉淀形成并非偶然，而是多種因素共同作用的結(jié)果：

1、溫度波動(dòng)

血清在反復(fù)凍融或儲(chǔ)存溫度不穩(wěn)定（如未嚴(yán)格保持在 - 20°C 或更低）時(shí)，蛋白質(zhì)溶解度下降，極易析出。這就好比在炎熱的夏天，原本溶解在水中的糖，當(dāng)水溫降低時(shí)，多余的糖就會(huì)結(jié)晶析出。

2、物理應(yīng)力

劇烈搖晃、震蕩或不當(dāng)?shù)囊埔翰僮鳎óa(chǎn)生氣泡）會(huì)破壞溶液中蛋白質(zhì)的穩(wěn)定狀態(tài)，促使聚集。想象一下平靜的湖面，當(dāng)被外力劇烈攪動(dòng)時(shí)，水面會(huì)泛起層層漣漪，甚至形成漩渦，血清中的蛋白質(zhì)在物理應(yīng)力的作用下也是如此。

3、時(shí)間因素

長(zhǎng)期儲(chǔ)存，尤其是不理想條件下，沉淀形成幾率顯著增加。就像存放時(shí)間過長(zhǎng)的食物會(huì)變質(zhì)一樣，血清在不良儲(chǔ)存環(huán)境下，隨著時(shí)間的推移，其內(nèi)部成分也會(huì)發(fā)生變化，導(dǎo)致沉淀的產(chǎn)生。

4、成分特性

血清本身富含易沉淀物質(zhì)，如纖維蛋白原（凝血關(guān)鍵因子）、脂蛋白及礦物質(zhì)離子。這些成分的存在，使得血清在特定條件下更容易出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

患于未然

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